概要(yào) 

玉(yù)米(mǐ)赤黴醇（Zearanol,ZAL）是(shì)一(yī)種(zhǒng)效果(guǒ)理(lǐ)想(xiǎng)的(de)皮(pí)埋增重(zhòng) 劑，为(wèi)一(yī)種(zhǒng)微生(shēng)物(wù)代(dài)謝产物(wù)，系(xì)非(fēi)固醇、非(fēi)激素類(lèi)化(huà)合物(wù)，商 品名(míng)字(zì)“畜大(dà)壯”。农業部(bù)畜牧兽医司在(zài)1997年(nián)就(jiù)發(fà)出(chū)通(tòng)知， 嚴禁“玉(yù)米(mǐ)赤黴醇（又名(míng)畜大(dà)壯、牛羊增肉(ròu)劑）埋植劑”用(yòng)于(yú) 畜牧業生(shēng)产。“玉(yù)米(mǐ)赤黴醇”具有雌激素样的(de)作(zuò)用(yòng)，大(dà)多(duō)數發(fà) 达(dá)國(guó)家(jiā)均禁止使用(yòng)。玉(yù)米(mǐ)赤黴醇及其(qí)代(dài)謝产物(wù)具有雌激素類(lèi)物(wù) 質(zhì)的(de)生(shēng)物(wù)活性(xìng)，对(duì)促性(xìng)腺激素結合受體(tǐ)、體(tǐ)外(wài)肝(gān)脏激素結合受 體(tǐ)均有抑制作(zuò)用(yòng)。雌激素類(lèi)物(wù)質(zhì)的(de)殘留会(huì)引起(qǐ)人體(tǐ)性(xìng)激素機(jī)能(néng) 紊亂及影響第(dì)二(èr)性(xìng)征的(de)正(zhèng)常發(fà)育，在(zài)外(wài)部(bù)条(tiáo)件(jiàn)誘導下(xià)，可(kě)能(néng)致(zhì)癌。 

本(běn)试劑盒是(shì)應(yìng)用(yòng)ELISA技术研發(fà)的(de)藥物(wù)殘留檢測产品，與(yǔ)儀器分(fēn)析技术相比具有快(kuài)速、簡便、準确和(hé)靈敏度(dù)高(gāo)等优點(diǎn)， 操作(zuò)时(shí)間(jiān)需45分(fēn)鐘(zhōng)，能(néng)減少(shǎo)工作(zuò)強(qiáng)度(dù)和(hé)操作(zuò)誤差。 

實(shí)验原理(lǐ) 

本(běn)试劑盒采用(yòng)間(jiān)接競争 ELISA 方(fāng)法，在(zài)酶标(biāo)闆微孔上(shàng)預包(bāo)被(bèi)玉(yù)米(mǐ)赤黴醇抗原，样本(běn)殘留的(de)玉(yù)米(mǐ)赤黴醇和(hé)微孔上(shàng)預包(bāo)被(bèi) 的(de)抗原競争玉(yù)米(mǐ)赤黴醇抗體(tǐ)（抗试劑），同(tóng)时(shí)玉(yù)米(mǐ)赤黴醇抗體(tǐ) 與(yǔ)酶标(biāo)二(èr)抗（酶标(biāo)物(wù)）相結合後(hòu)，經(jīng) TMB 底物(wù)顯色(sè)，样本(běn)吸光(guāng)值與(yǔ)其(qí)殘留物(wù)玉(yù)米(mǐ)赤黴醇呈負相關(guān)，與(yǔ)标(biāo)準曲(qū)線(xiàn)比較再乘以(yǐ)其(qí)对(duì)應(yìng)的(de)稀釋倍數，即可(kě)得出(chū)样本(běn)中(zhōng)玉(yù)米(mǐ)赤黴醇的(de)含量(liàng)。

适用(yòng)範圍

可(kě)定(dìng)性(xìng)、定(dìng)量(liàng)檢測成(chéng)品純牛奶、待裝(zhuāng)罐(guàn)奶、生(shēng)鲜奶样本(běn)中(zhōng)玉(yù)米(mǐ)赤黴醇的(de)含量(liàng)。

貯藏条(tiáo)件(jiàn)及有效期(qī) 

貯藏条(tiáo)件(jiàn)：保存试劑盒于(yú) 2~8℃。 

有效期(qī)：該产品有效期(qī)为(wèi) 12 个(gè)月(yuè)。

檢測步驟 

1、将所需试劑從冷(lěng)藏环(huán)境中(zhōng)取(qǔ)出(chū)，置于(yú)室(shì)温(wēn)（20~25℃）平 衡 30min 以(yǐ)上(shàng)，注意(yì)每種(zhǒng)液體(tǐ)试劑使用(yòng)前(qián)均須搖勻。 

2、取(qǔ)出(chū)需要(yào)數量(liàng)的(de)微孔闆，将不(bù)用(yòng)的(de)微孔闆放(fàng)進(jìn)原锡(xī)箔袋(dài)中(zhōng)並(bìng)且(qiě)與(yǔ)提(tí)供的(de)干(gàn)燥劑一(yī)起(qǐ)重(zhòng)新(xīn)密封(fēng)，保存于(yú) 2～8℃。切(qiè)勿冷(lěng)凍。 

3、洗涤液在(zài)使用(yòng)前(qián)也(yě)需回(huí)温(wēn)。 

4、編号(hào)：将样本(běn)和(hé)标(biāo)準品对(duì)應(yìng)微孔按序編号(hào)，每个(gè)样本(běn)和(hé)标(biāo) 準品做 2 孔平行，並(bìng)记录标(biāo)準孔和(hé)样本(běn)孔所在(zài)的(de)位(wèi)置。 

5、加标(biāo)準品/样本(běn)：加入(rù)标(biāo)準品或(huò)样本(běn) 50μL 到(dào)对(duì)應(yìng)的(de)微孔中(zhōng)， 加酶标(biāo)物(wù) 50μL/孔，再加入(rù)抗试劑 50μL/孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻， 用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置 25℃避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng) 30min。 

6、洗闆：小心(xīn)揭開(kāi)蓋闆膜，将孔內(nèi)液體(tǐ)甩干(gàn)，用(yòng)洗涤液 250μL /孔，充分(fēn)洗涤 4～5 次(cì)，每次(cì)間(jiān)隔 10s，在(zài)吸水(shuǐ)紙(zhǐ)上(shàng)拍干(gàn)（拍 干(gàn)後(hòu)未被(bèi)清(qīng)除的(de)气(qì)泡可(kě)用(yòng)未使用(yòng)过(guò)的(de)槍头(tóu)戳破）。

7、顯色(sè)：加入(rù)底物(wù)液 A 液 50μL/孔，再加入(rù)底物(wù)液 B 液 50μL/ 孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置 25℃避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn) 應(yìng) 15min。 

8、測定(dìng)：加入(rù)終(zhōng)止液 50μL/孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，設定(dìng)酶标(biāo)儀 于(yú) 450nm 处（建議用(yòng)双(shuāng)波(bō)长(cháng) 450/630nm 檢測，請在(zài) 5min 內(nèi)读完數據(jù)），測定(dìng)每孔 OD 值(若無酶标(biāo)儀，則不(bù)加終(zhōng) 止液用(yòng)目測法可(kě)進(jìn)行判定(dìng))。

 結果(guǒ)判定(dìng) 

若利用(yòng)试劑盒專業分(fēn)析软(ruǎn)件(jiàn)進(jìn)行計(jì)算，更(gèng)便于(yú)大(dà)量(liàng)样本(běn)的(de)準确、快(kuài)速分(fēn)析（歡迎来(lái)電(diàn)索取(qǔ)）。