檢測項目:藥物(wù)殘留
适用(yòng)样本(běn):生(shēng)鲜奶、蜂蜜
本(běn)试劑盒采用(yòng)間(jiān)接競争ELISA方(fāng)法,在(zài)酶标(biāo)闆微孔上(shàng)預包(bāo)被(bèi)呋喃妥因(yīn)代(dài)謝物(wù)抗原,样本(běn)中(zhōng)殘留的(de)呋喃妥因(yīn)代(dài)謝物(wù)和(hé)此(cǐ)抗原競争呋喃妥因(yīn)代(dài)謝物(wù)抗體(tǐ)(抗试劑),同(tóng)时(shí)呋喃妥因(yīn)代(dài)謝物(wù)抗體(tǐ)與(yǔ)酶标(biāo)二(èr)抗(酶标(biāo)物(wù))相結合,經(jīng)TMB底物(wù)顯色(sè),样本(běn)的(de)吸光(guāng)度(dù)值與(yǔ)其(qí)殘留物(wù)呋喃妥因(yīn)代(dài)謝物(wù)的(de)含量(liàng)呈負相關(guān),與(yǔ)标(biāo)準曲(qū)線(xiàn)比較再乘以(yǐ)其(qí)对(duì)應(yìng)的(de)稀釋倍數,即可(kě)得出(chū)样本(běn)中(zhōng)呋喃妥因(yīn)代(dài)謝物(wù)的(de)含量(liàng)。
适用(yòng)範圍
可(kě)定(dìng)性(xìng)、定(dìng)量(liàng)檢測生(shēng)鲜奶、蜂蜜样本(běn)中(zhōng)的(de)呋喃妥因(yīn)代(dài)謝物(wù)的(de)含量(liàng)。
1、 将所需试劑從冷(lěng)藏环(huán)境中(zhōng)取(qǔ)出(chū),置于(yú)室(shì)温(wēn)(20~25°C)平衡30min 以(yǐ)上(shàng),注意(yì)每種(zhǒng)液體(tǐ)试劑使用(yòng)前(qián)均須搖勻。
2、 取(qǔ)出(chū)需要(yào)數量(liàng)的(de)微孔闆,将不(bù)用(yòng)的(de)微孔闆放(fàng)進(jìn)原锡(xī)箔袋(dài)中(zhōng)並(bìng)且(qiě)與(yǔ)提(tí)供的(de)干(gàn)燥劑一(yī)起(qǐ)重(zhòng)新(xīn)密封(fēng),保存于(yú)2~8°C。 切(qiè)勿冷(lěng)凍。
3、 洗涤液在(zài)使用(yòng)前(qián)也(yě)需回(huí)温(wēn)。
4、 編号(hào):将样本(běn)和(hé)标(biāo)準品对(duì)應(yìng)微孔按序編号(hào),每个(gè)样本(běn)和(hé)标(biāo)準品做2孔平行,並(bìng)记录标(biāo)準孔和(hé)样本(běn)孔所在(zài)的(de)位(wèi)置。
5、 加标(biāo)準品/样本(běn):加标(biāo)準品/样本(běn)50μL到(dào)对(duì)應(yìng)的(de)微孔中(zhōng),再加入(rù)呋喃妥因(yīn)代(dài)謝物(wù)酶标(biāo)物(wù)50μL/孔,然後(hòu)再加入(rù)呋喃妥因(yīn)代(dài)謝物(wù)抗试劑50μL/孔輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻,用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置25°C避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng)30min。
6、 洗闆:小心(xīn)揭開(kāi)蓋闆膜,将孔內(nèi)液體(tǐ)甩干(gàn),用(yòng)洗涤液 250μL/孔,充分(fēn)洗涤4~5次(cì),每次(cì)間(jiān)隔10s,用(yòng)吸水(shuǐ)紙(zhǐ)拍干(gàn)(拍干(gàn)後(hòu)未被(bèi)清(qīng)除的(de)气(qì)泡可(kě)用(yòng)未使用(yòng)过(guò)的(de)槍头(tóu)戳破)。
7、 顯色(sè):加入(rù)底物(wù)液A液50μL/孔,再加底物(wù)液B液50μL/孔,輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻,用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置25°C避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng) 15min。
8、 測定(dìng):加入(rù)終(zhōng)止液50μL/孔,輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻,設定(dìng)酶标(biāo)儀于(yú) 450nm 处(建議用(yòng)双(shuāng)波(bō)长(cháng)450/630nm 檢測,請在(zài)5min內(nèi)读完數據(jù)), 測定(dìng)每孔OD值。
結果(guǒ)判定(dìng)
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