喹諾酮類(lèi)（QNs），又稱为(wèi)吡酮酸(suān)類(lèi)或(huò)吡啶酮酸(suān)類(lèi)，是(shì)一(yī)類(lèi)重(zhòng)要(yào)的(de)廣譜抗生(shēng)素藥物(wù)，能(néng)够抑制细(xì)菌DNA螺旋酶，常被(bèi)作(zuò)为(wèi)抗感(gǎn)染藥物(wù)在(zài)水(shuǐ)产畜禽養殖中(zhōng)使用(yòng)。由(yóu)于(yú)其(qí)存在(zài)耐藥性(xìng)和(hé)潛在(zài)致(zhì)癌性(xìng)，世界各(gè)國(guó)对(duì)其(qí)部(bù)分(fēn)藥物(wù)的(de)限量(liàng)值（MRL）作(zuò)了明(míng)确規定(dìng)。

本(běn)试劑盒是(shì)應(yìng)用(yòng)ELISA技术研發(fà)的(de)新(xīn)一(yī)代(dài)藥物(wù)殘留檢測产品，與(yǔ)儀器分(fēn)析技术相比具有快(kuài)速、簡便、靈敏度(dù)高(gāo)等优點(diǎn)，能(néng)減少(shǎo)工作(zuò)強(qiáng)度(dù)。

1、将所需试劑從冷(lěng)藏环(huán)境中(zhōng)取(qǔ)出(chū)，置于(yú)室(shì)温(wēn)（20～25℃）回(huí)温(wēn)30min以(yǐ)上(shàng)，注意(yì)每種(zhǒng)液體(tǐ)试劑使用(yòng)前(qián)均需輕(qīng)輕(qīng)搖勻。

2、取(qǔ)出(chū)需要(yào)數量(liàng)的(de)微孔闆，将不(bù)用(yòng)的(de)微孔闆放(fàng)進(jìn)原锡(xī)箔袋(dài)中(zhōng)並(bìng)且(qiě)與(yǔ)提(tí)供的(de)干(gàn)燥劑一(yī)起(qǐ)重(zhòng)新(xīn)密封(fēng)，保存于(yú)2～8℃。切(qiè)勿冷(lěng)凍。

3、洗涤液（配液1）在(zài)使用(yòng)前(qián)也(yě)需回(huí)温(wēn)。

4、編号(hào)：将样本(běn)和(hé)标(biāo)準品对(duì)應(yìng)微孔按序編号(hào)，每个(gè)样本(běn)和(hé)标(biāo)準品做2孔平行，並(bìng)记录标(biāo)準孔和(hé)样本(běn)孔所在(zài)的(de)位(wèi)置。

5、加标(biāo)準品/样本(běn)：加标(biāo)準品或(huò)样本(běn)50μL到(dào)对(duì)應(yìng)的(de)微孔中(zhōng)，然後(hòu)加入(rù)喹諾酮類(lèi)酶标(biāo)物(wù)50μL/孔，最(zuì)後(hòu)加入(rù)喹諾酮類(lèi)抗试劑50μL/孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置于(yú)25℃

避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng)30min。

6、洗闆：小心(xīn)揭開(kāi)蓋闆膜，将孔內(nèi)液體(tǐ)甩干(gàn)，用(yòng)洗涤液（配液1）250μL/孔，充分(fēn)洗涤4～5次(cì)，每次(cì)間(jiān)隔10s，用(yòng)吸水(shuǐ)紙(zhǐ)拍干(gàn)（拍干(gàn)後(hòu)若有气(qì)泡，可(kě)用(yòng)未使用(yòng)过(guò)的(de)槍头(tóu)戳破）。

7、顯色(sè)：加入(rù)底物(wù)液A液50μL/孔，再加底物(wù)液B液50μL/孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置于(yú)25℃避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng)15min。

8、測定(dìng)：加入(rù)終(zhōng)止液50μL/孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻。設定(dìng)酶标(biāo)儀于(yú)450nm处（建議用(yòng)双(shuāng)波(bō)长(cháng)450/630nm檢測，請在(zài)5min內(nèi)读完數據(jù)），測定(dìng)每孔OD值(若無酶标(biāo)儀，則不(bù)加終(zhōng)止液用(yòng)

目測法可(kě)進(jìn)行判定(dìng))。