磺胺類(lèi)（SAs）藥物(wù)在(zài)水(shuǐ)产畜禽養殖中(zhōng)應(yìng)用(yòng)十(shí)分(fēn)廣泛，主(zhǔ)要(yào)在(zài)動(dòng)物(wù)疾病防治方(fāng)面(miàn)有顯著的(de)療效，但與(yǔ)此(cǐ)同(tóng)时(shí)，这(zhè)類(lèi)藥物(wù)顯著的(de)毒副作(zuò)用(yòng)也(yě)引起(qǐ)了人们(men)的(de)廣泛關(guān)注。例如：影響泌尿系(xì)統功能(néng)，引起(qǐ)結晶尿，血(xuè)尿等反(fǎn)應(yìng)及致(zhì)癌性(xìng)。因(yīn)此(cǐ)國(guó)內(nèi)外(wài)对(duì)動(dòng)物(wù)性(xìng)食品中(zhōng)磺胺類(lèi)藥物(wù)以(yǐ)及單一(yī)磺胺藥物(wù)的(de)殘留限量(liàng)都做出(chū)了相應(yìng)的(de)規定(dìng)。

本(běn)试劑盒是(shì)應(yìng)用(yòng)ELISA技术研發(fà)的(de)藥物(wù)殘留檢測产品，具有快(kuài)速、簡便和(hé)靈敏度(dù)高(gāo)等优點(diǎn)，操作(zuò)时(shí)間(jiān)需45min，能(néng)減少(shǎo)檢測时(shí)間(jiān)和(hé)操作(zuò)誤差。

1、将所需试劑從冷(lěng)藏环(huán)境中(zhōng)取(qǔ)出(chū)，置于(yú)室(shì)温(wēn)（20～25℃）平衡30min以(yǐ)上(shàng)，注意(yì)每種(zhǒng)液體(tǐ)试劑使用(yòng)前(qián)均須搖勻。

2、取(qǔ)出(chū)需要(yào)數量(liàng)的(de)微孔闆，将不(bù)用(yòng)的(de)微孔闆放(fàng)進(jìn)原锡(xī)箔袋(dài)中(zhōng)並(bìng)且(qiě)與(yǔ)提(tí)供的(de)干(gàn)燥劑一(yī)起(qǐ)重(zhòng)新(xīn)密封(fēng)，保存于(yú)2～8℃。切(qiè)勿冷(lěng)凍。

3、洗涤液【配液1】在(zài)使用(yòng)前(qián)也(yě)需回(huí)温(wēn)。

4、編号(hào)：将样本(běn)和(hé)标(biāo)準品对(duì)應(yìng)微孔按序編号(hào)，每个(gè)样本(běn)和(hé)标(biāo)準品做2孔平行，並(bìng)记录标(biāo)準孔和(hé)样本(běn)孔所在(zài)的(de)位(wèi)置。

5、加标(biāo)準品/样本(běn)：加标(biāo)準品或(huò)样本(běn)50µL/孔到(dào)对(duì)應(yìng)的(de)微孔中(zhōng)，再加入(rù)磺胺類(lèi)多(duō)殘留酶标(biāo)物(wù)50µL/孔，再加入(rù)磺胺類(lèi)多(duō)殘留抗试劑50µL/孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置于(yú)25℃   避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng)30min。

6、洗闆：小心(xīn)揭開(kāi)蓋闆膜，将孔內(nèi)液體(tǐ)甩干(gàn)，用(yòng)洗涤液【配液1】250µL/孔，充分(fēn)洗涤4~5次(cì)，每次(cì)間(jiān)隔10s，用(yòng)吸水(shuǐ)紙(zhǐ)拍干(gàn)（拍干(gàn)後(hòu)未被(bèi)清(qīng)除的(de)气(qì)泡可(kě)用(yòng)未使用(yòng)过(guò)的(de)槍头(tóu)戳破）。

7、顯色(sè)：加入(rù)底物(wù)液A液50µL/孔，再加底物(wù)液B液50µL/孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，用(yòng)蓋闆膜蓋闆後(hòu)置于(yú)25℃避光(guāng)环(huán)境中(zhōng)反(fǎn)應(yìng)15min。

8、測定(dìng)：加入(rù)終(zhōng)止液50µL/孔，輕(qīng)輕(qīng)振蕩混勻，設定(dìng)酶标(biāo)儀于(yú)450nm处（建議用(yòng)双(shuāng)波(bō)长(cháng)450/630nm檢測，請在(zài)5min內(nèi)读完數據(jù)），測定(dìng)每孔OD值(若無酶标(biāo)儀，則不(bù)加終(zhōng)

止液用(yòng)目測法可(kě)進(jìn)行判定(dìng))。